进行植物黄酮C-糖苷生物合成途径的研究,不仅可以揭示不同化学成分在植物体中的形成、转化及其相互关系的本质规律;而且对进一步利用现代生物技术方法进行黄酮C-糖苷的生产也有着实际的意义。本项目以荞麦(Fagopyrum esculentum M.)幼苗为试材,开展黄酮C-糖苷生物合成及其关键酶的相关研究。结果表明,在荞麦子叶中黄酮C-糖苷的含量最高,下胚轴中仅有少量,而鲜根中几乎不含黄酮C-糖苷或很少。利用基因重组酵母制备VitGT酶反应底物2-hydroxynaringenin,并据此建立了VitGT酶活性测定反应体系。同时,VitGT酶活性较高的为30-40%和40-60%硫酸铵饱和度部分。经过硫酸铵分级沉淀得到的具有活性的VitGT酶,不能通过DEAE柱层析和MonoQ柱层析进一步纯化。此外,采用2-D gel技术,从子叶和根VitGT粗酶液样品中筛选得到42个差异蛋白斑点,为进一步获得与荞麦黄酮C-糖苷生物合成相关的酶蛋白或基因提供了基础。
英文主题词Flavonoid C-glucosides; flavonoid C-glucosyltransferase; biosynthesis; secondary metabolism.