中文摘要：

法尼醇X受体(FXR,一种重要核受体）和血栓调节蛋白(thrombomodulin,TM)均表达于血管内皮细胞，且二者均具重要抗炎功能，但核受体FXR能否调节TM的表达，目前尚不清楚。本项目在率先证实"在血管内皮细胞中，FXR能明显上调TM表达，且这种上调始发于转录水平"的基础上，拟借助报告基因检测、EMSA、Super EMSA、染色质免疫沉淀等技术，详细解析出FXR在Tm基因5＇调控区中的具体结合位点，明确Tm是FXR的一个新靶基因，从而阐明FXR在转录水平上促进TM表达的分子机制；进而经检测活化蛋白C的产生能力、siRNA使Tm基因转录后沉默、检测多个炎症相关分子表达水平等体外实验以及在体观察FXR对TM表达的上调作用和这种上调作用在FXR发挥抗炎功能中的重要性，以期揭示"通过上调TM而发挥抗炎作用"是FXR的一个抗炎新机制，从而为探索以FXR和TM为靶标的抗炎新措施提供科学依据。

结论摘要：

血栓调节蛋白(thrombomodulin，TM) 和法尼醇X 受体(farnesoid X receptor，FXR，一种重要核受体）均表达于血管内皮细胞（vascular endothelial cells, VECs），且二者均具重要抗炎功能，但核受体FXR 能否调节TM的表达，目前尚不清楚。本项目首先证实FXR可在VECs中明显上调TM mRNA和相应蛋白的表达；然后借助荧光素酶报告基因检测、电泳迁移率变动实验（Electrophoretic mobility shift assay，EMSA）、染色质免疫沉淀（chromatin immunoprecipitation，ChIP)实验等技术，详细解析出了FXR 在Tm基因5 ＇调控区中的具体结合位点IR8 (-503 AGGTCCtcccaaagTGCCCT-484)，明确了Tm是FXR 的一个新靶基因，从而初步阐明了FXR 在转录水平上促进TM表达的分子机制。体外功能实验显示，FXR上调TM表达后，能在VEC增强活化蛋白C 的产生能力，表明FXR-TM通路能在体外发挥抗炎功能。小鼠体内实验显示，FXR的激动剂能在体上调TM的表达，并发挥抗炎作用。以上研究结果提示，FXR-TM通路是FXR的一个抗炎新机制，该通路可能是抗炎的潜在新靶点。此外，我们的研究还发现（1）FXR可在肝细胞中明显促进CISH(cytokine inducible SH2-containing protein)的表达，并能抑制IL-6诱导的STAT5的磷酸化，提示FXR在抑制细胞因子相关的炎症反应中发挥了重要作用；（2）miR-421可显著抑制FXR的表达，这种抑制作用促进了肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭，提示miR-421 可能是调控FXR水平的重要因素，miR-421-FXR通路可能是肝癌治疗的潜在新靶点。以上有关研究结果已发表论文4篇（其中SCI论文3篇）。