⑴用qRT-PCR和免疫组织化学法检测OY-TES-1mRNA和蛋白,发现HCC中其mRNA的表达量显著高于对应的癌旁组织及正常肝组织;其蛋白阳性率为16.2%,肝硬化和正常肝组织中均为阴性。统计学分析未发现OY-TES-1的表达与临床病理参数相关。⑵用BSP检测肝癌细胞株OY-TES-1启动子CpG位点,发现呈高甲基化,经5-Aza-CdR诱导后,CpG位点甲基化频率下降。⑶用ELISA检测发现,HCC患者血清中存在针对OY-TES-1全长和氨基端蛋白的抗体,其阳性率分别为20.7%和18.7%,肝硬化和正常人血清均为阴性。血清抗体的出现与HCC患者临床病理参数无关。⑷体外实验证实,用OY-TES-1蛋白致敏DC诱导出的CTL,能特异性杀伤OY-TES-1阳性的肝癌细胞株。⑸将构建的OY-TES-1真核表达载体转入肝癌细胞,未发现OY-TES-1对细胞的生长、增殖及迁移能力有明显影响;用RNAi沉默肝癌细胞OY-TES-1表达后,发现该基因可抑制细胞增殖并诱导凋亡。上述结果提示,OY-TES-1能在HCC中特异性的表达并引起免疫反应,将其用于HCC免疫治疗具有潜在的应用开发前景。
英文主题词OY-TES-1;Hepatocellular carcinoma