中文摘要：

流式阵列(flow array, FA)是能保证信息质量和提供相对高通量的革命性的分子探测平台, 发展高性能流式阵列是国际生物医学传感领域应用基础研究前沿。啤酒酵母细胞呈球形或椭球形,以分散单细胞状态存在, 大小与流式聚苯乙烯微球相仿,约(3-8)微米×(5-10)微米, 其完整壁膜结构有利于细胞形态稳定和长期保存, 本课题结合申请人研究积累, 拟以啤酒酵母细胞作为流式微球, 探索细胞流式阵列的示踪荧光CFSE稳定编码、人工接头分子聚异戊二烯化寡肽生物催化合成及其细胞膜组装。在上述工作基础上,以肺癌血清标志物CYFRA21-1和NSE为模式分子, 验证基于示踪荧光稳定编码和人工接头分子的啤酒酵母细胞流式阵列的分析性能, 为发展基于细胞流式阵列的体外诊断试剂提供基础研究资料和关键技术参数。

结论摘要：

发展高性能流式阵列是国际生物医学传感领域应用基础前沿。啤酒酵母呈球形或椭球形,以分散单细胞状态存在, 大小与流式聚苯乙烯微球相仿,约(3-8)微米×(5-10)微米, 其完整壁膜结构有利于长期保存。本课题利用酵母细胞为流式微球、肺癌血清标志物(CYFRA21-1、NSE)为模式分子, 研究了CFSE稳定编码、人工接头分子及其生物偶联细胞膜组装，以探索细胞流式阵列。研究显示，2%多聚甲醛室温固定10min、CFSE 4°C避光染色30min处理细胞，流式FL2 vs. FL1点图中细胞群界限清晰。通过高碘酸钠氧化(酵母表面糖基生成醛基)、人工接头分子偶联，以monoclonal mouse anti-human CYFRA21-1包被细胞、PE goat anti-mouse为报道分子，流式细胞仪检测表明人工接头分子能够介导抗体与细胞结合。冻干保存的编码细胞/人工接头分子/捕获抗体复合物可稳定保存六个月(R.E.<15%)。使用人工接头分子膜修饰细胞流式阵列和FCAP分析软件，CYFRA21-1、NSE的检测下限分别为500pg/mL、300pg/mL。结果提示，通过进一步发展和完善，具有“simple & easy”鲜明特色的酵母流式阵列可作为体外诊断试剂使用。