中文摘要：

肝癌作为一种与代谢综合症紧密相关的癌症，其代谢机制研究正受到广泛关注。已知ChREBP对于调节正常肝脏细胞的葡萄糖和脂肪酸代谢以及脂肪肝形成起到重要作用。我们已发表的研究首次证明ChREBP的表达对于肝癌细胞增殖是必需的，但是ChREBP调节肝癌细胞代谢和增殖的具体分子机制尚不清楚。本课题将通过以下四项研究深入了解ChREBP如何调节肝癌细胞代谢和增殖1）研究调节ChREBP基因表达的上游糖代谢信号通路；2）研究ChREBP的乙酰化修饰是否调节ChREBP的转录活性和肝癌细胞增殖；3）通过蛋白质组学的方法寻找ChREBP的蛋白相互作用网络及转录复合体的组成；4) 通过染色质免疫沉淀和测序结合的方法（ChIP-Seq）系统性鉴定直接受ChREBP调节的靶基因。本课题将为下一步开发ChREBP表达和转录活性抑制药物用于肝癌防治的临床研究提供理论基础，从而为肝癌治疗提供新的分子靶点。

结论摘要：

ChREBP是肝脏中调控糖脂代谢的关键转录因子,葡萄糖不仅能够促进ChREBP转录,而且可以通过调控ChREBP翻译后修饰增加细胞核内ChREBP水平和活性。与癌旁组织相比，ChREBP在肝癌组织中表达增加。我们已发表的研究表明ChREBP是维持肝癌细胞糖酵解、合成性代谢和细胞增殖必需的，但是 ChREBP 调节肝癌细胞代谢和增殖的具体分子机制尚不清楚。在本课题的资助下，我们按照原计划主要进行了以下研究1）我们发现糖尿病患者体内增多的晚期糖基化终末产物（AGEs）作为一种糖代谢信号，通过增加肝癌细胞活性氧（ROS）水平进而诱导转录因子ChREBP的表达和激活。AGEs能够加快肝癌细胞增殖速率，并且ChREBP对于AGEs促进肝癌细胞增殖至关重要。2）在对于葡萄糖促进ChREBP转录的机制研究中，我们发现转录因子HNF4alpha是介导葡萄糖促进ChREBP转录效应的重要因子。3）我们通过蛋白质组学方法寻找与ChREBP相互作用的蛋白并探讨ChREBP调控转录的分子机制，发现Flightless-I（FLII）是肝癌细胞中ChREBP转录复合体的重要组分，FLII负调控ChREBP的转录活性，是ChREBP的转录共抑制因子。4）已知乙酰转移酶p300与ChREBP相互作用，增加ChREBP蛋白乙酰化水平和转录活性，但是动态调控ChREBP乙酰化修饰的去乙酰化酶尚不明确。我们发现去乙酰化酶Sirt1和HDAC1与ChREBP结合，降低ChREBP乙酰化修饰水平和蛋白稳定性。5）已知转录因子ChREBP可以被泛素化修饰，但是调控ChREBP泛素化修饰的E3连接酶未知，ChREBP泛素化修饰的分子机制也不明确。我们发现泛素E3连接酶Smurf1与ChREBP结合，增加ChREBP蛋白泛素化水平，改变ChREBP的细胞内定位。我们围绕调控ChREBP的上游信号通路、ChREBP的转录复合体组成和翻译后修饰等方面对于ChREBP调控肝癌细胞代谢和增殖的分子机制进行了一系列研究，不仅将有助于从代谢角度全面分析肝癌的发病机理，并且为糖尿病患者肝癌风险增加提出了可能的新机制，也将为设计针对转录因子ChREBP及其结合蛋白的小分子药物防治肝癌提供创新性思路。