中文摘要：

动脉粥样硬化斑块破裂是急性冠状动脉综合征（ACS）最重要的始动环节。CD73在动脉粥样硬化斑块发展中的作用日益受到重视。本课题组前期研究发现CD73-/-小鼠血管内皮细胞血管新生能力降低,CD73高表达可以促进MB-MDA-231细胞MMP2/9的活化及表达,因此设想 CD73可通过促进斑块内血管新生、MMPs分泌而导致斑块破裂。首先本课题将构建CD73和ApoE双基因敲除小鼠，建立CD73-/-ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块破裂模型，体内研究CD73对粥样斑块破裂、血管新生、MMPs、TIMPs分泌的影响；其次原代培养上述小鼠血管内皮细胞、平滑肌细胞、巨噬细胞,观察CD73与血管新生、MMPs、TIMPs分泌的关系并探讨腺苷受体通路；最后利用蛋白组学及转录因子芯片技术研究CD73调控的未知蛋白。以期阐明CD73在动脉粥样硬化斑块破裂中的作用及机制，为ACS提供新的防治途径。

结论摘要：

CD73是由GPI锚定在细胞膜外表面的糖蛋白。其主要功能是水解AMP生成腺苷。研究发现CD73基因敲除小鼠动脉新生内膜形成伴随巨噬细胞增多以及VCAM-1 表达增多，CD73可以抑制血小板活化以及单核细胞与内皮细胞的黏附。CD73还参与细胞中脂滴形成过程。提示CD73在动脉粥样硬化(AS)的发生发展过程中可能发挥着重要作用，但是如何发挥作用及其作用机制目前国内外鲜有报导。本研究分三部分一、体内实验研究CD73在AS中的作用。培育CD73-/-ApoE-/-双敲小鼠，高脂喂养建立AS模型。结果显示，CD73-/-ApoE-/-小鼠体重、血浆甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白明显低于ApoE-/-小鼠。CD73-/-ApoE-/-小鼠动脉粥样斑块总面积占血管总面积的比例明显低于ApoE-/-小鼠。两组小鼠肝脏中的脂质代谢关键酶的基因水平变化显示，ApoE-/-CD73-/-小鼠的LCAT和CYP7A1 mRNA水平明显高于ApoE-/-小鼠，HL、PPARα、PPARγ、FDPS的mRNA水平明显低于ApoE-/-小鼠。二、培养野生型和CD73-/-小鼠的原代肝细胞，探讨CD73在AS发生发展中的作用机制。实验发现， CD73-/-小鼠原代肝细胞内胆固醇水平明显降低。腺苷和CD73的特异性酶抑制剂（APCP）分别能升高和降低胞内胆固醇水平。三、培养人脐动脉平滑肌细胞（HUASMC），利用RNA干扰技术抑制CD73表达，观察CD73对HUASMC的炎症因子释放、迁移、增殖能力的影响。结果表明①siRNA抑制CD73的表达，显著升高IL-8和MCP-1的mRNA水平。干扰CD73后细胞上清中的MCP-1水平显著升高。②siRNA使MMP-1mRNA水平显著升高。腺苷和APCP分别能够抑制和促进HUASMC的迁移。③siRNA使HUASMC的增殖能力下降。综上得出以下结论1.CD73与AS形成有关，可促进动脉粥样斑块形成和体内血脂水平升高；2.CD73可以提高小鼠原代肝细胞内胆固醇水平，其作用机制与CD73产生的腺苷有关；3.CD73可以抑制HUASMC炎症因子释放和迁移能力，促进HUASMC的增殖能力。本课题首次提出并探讨了CD73对原代肝细胞和平滑肌细胞的影响，为CD73在AS中的研究提供了新的思路。我们的研究为CD73作为AS防治的新靶点提供了理论基础。