本研究根据环境内分泌干扰物质(EDCs)毒理研究发展的需要,结合发育生物学在鱼类性别决定和性别分化领域的最新研究成果,运用现代分子生物学的技术和方法,将系统研究壬基酚、阿特拉津、有机锡等典型内分泌干扰物质对鱼类性别分化相关基因(如DMY, SOX9, DAX1, DMRT1, SF-1, WT-1等)表达的影响,开发可用于化学物质激素活性评价、环境EDCs监测的分子生物标记物,为推动EDCs毒理学
本项目基于以实时定量RT-PCR为主要手段的分子生物学试验平台,建立了同步提取青鳉鱼单卵或幼鱼RNA和DNA并鉴定性别的方法,先后从青鳉鱼中克隆了20几个性别分化,性腺发育和激素合成相关的基因。本研究克隆、建立并验证了RPL-7作为研究 EDCs的内参基因,开发了RNA和DNA从单个青鳉鱼卵中同步提取的方法,系统研究了壬基酚、阿特拉津、p.p'-DDE、有机锡等典型内分泌干扰物质对鱼类性别分化相关基因(DMY、DMRT1A、SOX9, DAX1, SF-1, WT-1、AMH等)和性腺发育基因(VTG-I、VTG-II、CHG-H、CHG-L、ERalpha、ERbeta、GTH、VTG-R)、激素合成相关基因(CYP19a、CYP19b、CYP17、STAR)表达的影响。发现除传统的标记物基因VTG-I、VTG-II、CHG-H、CHG-L外, AMH、ERalpha、CYP19b、CYP17等基因对外源内分泌干扰物质的暴露也较为敏感,可以作为新的标记物基因。