应用定点突变技术分别对细胞色素b5 表面、疏水斑区、血红素疏水袋上的氨基酸残基进行了突变,成功地得到了一系列突变体的蛋白。用(1)H NMR 和X-衍射方法研究了蛋白质的构象,用各种谱学方法和电化学方法研究了血红素转移反应、热稳定性、酸稳定性以及蛋白质的氧化还原电位,研究了细胞色素b5 的结构功能,以及与细胞色素C 的相互作用和电子传递。结果确证了表面荷电残基的改变,并不太大改变金属蛋白结构稳定性,但它却在蛋白之间的识别、结合、电子传递中起了重要作用。然而,疏水斑区和疏水袋上的改变,却大大影响蛋白质结构、稳定性和基本性质。这些结果已受到国内外同行好评和关注。
英文主题词electron transfer; cytochromes; protein engineering