中文摘要：

感音神经性聋是一种常见疾病，严重影响人类的生活质量。目前，对于感音神经性聋尚无有效的治疗方法。近年来，基因治疗获得了重要突破，有望解决感音神经性聋这一难题。本项目组的前期研究证实性联凋亡蛋白抑制因子（XIAP）过度表达可以明显遏制毛细胞的凋亡，延缓老年性聋的发生；对抗顺铂及庆大霉素导致的毛细胞凋亡，起到保护听力的作用。这为感音神经性聋的防治提供了新的思路和手段。然而在耳蜗局部转染的研究中，尽管我们成功地将XIAP转染至耳蜗内，但是XIAP在耳蜗毛细胞的表达不理想，这制约了关于XIAP局部转染防治耳聋构思的实现。改良及制备高效安全的载体是迫切需要解决的问题之一。因此，本项目将探讨采用耳蜗毛细胞特异性启动子-Myo7a来制备新的AAV2载体，并在此基础上敲除载体表面的酪氨酸残基以提高AAV2载体转染效率的可行性。本项目的完成必将推动耳蜗基因治疗的进一步发展。

结论摘要：

感音神经性聋是一种常见疾病，严重影响人类的生活质量。目前，对于感音神经性聋尚无有效的治疗方法。近年来，基因治疗获得了重要突破，有望解决感音神经性聋这一难题。然而在耳蜗局部转染的研究中，尽管成功转染至耳蜗内报道较多，但在耳蜗毛细胞的表达不理想。改良及制备高效安全的载体是迫切需要解决的问题之一。因此，本项目构建以Myo7a为启动子的AAV2及AAV8载体；定点突变技术将上述载体表面暴露的酪氨酸残基基因敲除，构建以Myo7a为启动子酪氨酸残基基因敲除的AAV2及AAV8载体。并采用改良的载体经耳蜗开窗途径进行转染，发现改良载体明显提高了毛细胞转染效率，尤其突变型AAV8效率更高。在内毛细胞转染效率达到83%，外毛细胞转染效率达到47%。通过耳蜗开窗途径将改良AAV2 注射到内耳，ABR 阈值无明显变化,毛细胞无明显缺失，证明了其安全性。