乙酰胆碱酯酶(AChE)是有机磷(OP)和氨基甲酸酯(CB)类农药的主要作用靶标。大多数昆虫有两种AChE。克隆了31个品种家蚕两种AChE基因,发现家蚕2型ace 相对保守。不同品种对不同的农药具有不同的敏感性。定量PCR结果表明,在卵、1-3龄幼虫时期,2型AChE的表达水平明显高于1型AChE,而在4-5龄幼虫中,两种AChE的表达水平相似。克隆表达了野蚕的两种AChE基因,重组1型AChE对ATC、BTC、和PTC的水解速率(Vmax)分别是2型AChE的2.78、8.27、1.3倍。抑制动力学分析表明,在9种OP和CB类抑制剂中,1型AChE对其中8种更敏感,但2型对其中的庚烯磷更敏感。追寄蝇是蚕的重要寄生虫,我们首次克隆并表达了家蚕追寄蝇的AChE基因,发现了一个与抗性相关的点突变 (Gly353Ala)。将表达的追寄蝇的AChE与其宿主的AChE进行抑制动力学比较发现,追寄蝇的AChE对农药更敏感,解释了OP农药能选择性杀灭寄生蝇机理。本研究还建立了1种规模化生产、纯化重组AChE,并将其用于农药残留监测的新方法。
英文主题词Bombyx; Exorista sorbillans; 2 acetylcholinesterase 1; acetylcholinesterase 2; comparison