染色体异倍化是昆虫细胞培养中常见的一个现象,异倍化会造成细胞的生物学特性不稳定,影响其在细胞工程方面的应用;但异倍化发生的原因和机理目前尚不清楚。我们在前期的工作中检测到不同的昆虫细胞株在异倍化之前均呈现出活性氧水平异常升高;由于活性氧与染色体不稳定和有丝分裂异常有直接的关系,故推测活性氧水平升高可能是染色体异倍化的诱发因素。本项目拟采用三种自建的昆虫细胞系为实验对象,从原代培养开始,通过实时检测活性氧水平,并同时进行染色体分析,来研究活性氧水平变化和染色体异倍化的时间模式,推测二者之间的关系。然后人为调控活性氧水平,验证活性氧水平的变化对染色体异倍化的影响。旨在阐明活性氧升高是否是离体培养的昆虫细胞染色体异倍化的诱发因素,为更好的开发和利用昆虫细胞系提供思路。
染色体异倍化是昆虫细胞培养中常见的一个现象,异倍化会造成细胞的生物学特性不稳定,影响其在细胞工程方面的应用;但异倍化发生的原因和机理目前尚不清楚。我们在前期工作中检测到不同昆虫细胞株在异倍化之前均呈现出活性氧水平异常升高;由于活性氧与染色体不稳定和有丝分裂异常有直接的关系,故推测活性氧水平升高可能是染色体异倍化的诱发因素。本项目采用了三种自建的昆虫细胞系为实验对象,从原代培养开始,通过实时检测活性氧水平,并同时进行染色体分析,来研究活性氧水平变化和染色体异倍化的时间模式,推测二者之间的关系。然后人为调控活性氧水平,验证活性氧水平的变化对染色体异倍化的影响。我们的研究结果表明活性氧水平确实是诱发染色体异倍化的重要因素。在不同的细胞系中,人为提高细胞中的活性氧水平均会显著提高细胞染色体异倍化的比率,而通过加入抗氧化剂来人为降低活性氧水平后,则会显著降低细胞异倍化的比率,并延迟异倍化的发生。本项目的原定计划只是在昆虫细胞中验证活性氧水平对染色体异倍化的影响,但在实验开展过程中,我们还另外实验了一株人结肠癌细胞系(LOVO)和大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)的染色体异倍化情况,结果表明这些永生系的细胞均存在程度很高的染色体异倍化状况。基于已有的实验数据,目前已发表SCI论文一篇,另有一篇正在撰写中。