中文摘要：

细丝蛋白（Filamin，FLN）参与血管平滑肌细胞（VSMC）的分化迁移、炎症及细胞信号转导等多方面进程，对于动脉发育-成熟-功能健全-老化以及病理性动脉硬化具有重要生物学意义。利用RNA干扰技术引起VSMC中FLNmRNA表达沉默，建立FLN缺乏的VSMC细胞系及动物模型。观察FLN及其编码基因在VSMC中的表达模式及规律，FLN缺乏VSMC增殖活动能力和表型的变化，了解该蛋白在VSMC迁移、增殖及分化中的作用及可能的机制。通过免疫化学及病理学技术观察转染RNA干扰基因片段的动脉粥样硬化动物模型及培养细胞中VSMC和血管形态、结构、功能的变化，明确FLN基因成为动脉粥样硬化疾病基因治疗靶点的可能性。

结论摘要：

背景细丝蛋白在动脉发育-成熟-功能健全-老化及病理性动脉硬化中具有重要生物学意义。利用RNAi使FLNmRNA表达降低，可能从基因水平上预防或治疗动脉粥样硬化的作用。材料与方法设计多条可诱发FLNmRNA表达沉默的SiRNA片段，构建质粒载体并转染细胞，鉴定FLNmRNA抑制效果并检测FLN蛋白的表达。ox-LDL培养后，观察细胞生长增殖情况、细胞周期、凋亡坏死率、多种蛋白表达、细胞骨架、细胞形态及超微结构变化。结果设计的SiRNA可有效抑制FLNmRNA的表达，可达60%以上。FLN/Actin蛋白的比值与对照组相比均明显下降。转染组细胞的增殖能力明显低于正常组细胞，凋亡坏死比率相似。两组细胞的形态学、细胞骨架构型及超微结构则未见明显差异。给予ox-LDL后正常组细胞增殖能力明显增强，α-SM-Actin表达降低而FLN表达增高，细胞形态结构及功能学改变均提示多数VSMC向合成表型转化。结论利用RNAi抑制FLN在VSMC中的生成，有效减少病理状态下VSMC向合成表型转化，且对正常细胞的形态及结构无明显影响。可从基因水平上预防或治疗动脉粥样硬化及支架术后血管再狭窄的作用。