中文摘要：

硼中子俘获治疗（BNCT）在恶性神经胶质瘤和其他肿瘤的治疗方面, 具有手术、化疗放疗不具备的选择性杀死肿瘤细胞的特点，其成功前提是将含硼化合物高效、靶向传输到肿瘤细胞中。本课题在前期含硼免疫脂质体研究的基础上，拟构建一种新型的靶向兼成像双功能免疫脂质体，即利用金黄葡萄球菌蛋白A的抗体结合域ZZ和海洋桡脚类动物的高敏感荧光素酶组成融合蛋白，修饰含硼脂质体表面，构成前免疫脂质体。这种前免疫脂质体能够与EGFR(表面生长因子受体)的抗体或任何抗体结合，构成具有靶向兼成像功能的药物导入系统。在向表达EGFR的神经胶质瘤高效靶向导入含硼化合物的同时，通过底物腔肠素（coelenterazine）与荧光素酶的化学发光反应检测免疫脂质体在肿瘤内的分布。本课题中的双功能免疫脂质体在裸鼠体内具有长循环特性，有利于将高剂量的含硼化合物导入到神经胶质瘤细胞中，为硼中子俘获治疗提供基础数据。

结论摘要：

硼中子俘获治疗（BNCT）在恶性神经胶质瘤和其他肿瘤的治疗方面, 具有手术、化疗放疗不具备的选择性杀死肿瘤细胞的特点，其成功前提是将含硼化合物高效、靶向传输到肿瘤细胞中。本课题的目的是构建一种新型的靶向兼成像双功能免疫脂质体，在向肿瘤细胞中高效传送含硼化合物的同时，能够显示硼化合物在组织和细胞中的位置。这种靶向兼成像多功能脂质体在肿瘤诊断和治疗中具有潜在的应用前景。 我们首先优化了硼化合物BSH的脂质体包封方法，利用反向蒸发法制备了含硼脂质体，BSH的包封效率达到10.99%。在脂质体的粒径控制上，采用了超声结合均质仪的方法，将脂质体的粒径稳定地控制在100nm左右。成功构建了抗体结合域ZZ和高敏感荧光素酶组成的融合蛋白GLase-ZZ的原核表达载体，并在大肠杆菌中成功表达，获得了大量纯化的蛋白。体外细胞实验中，利用anti-EGFR的抗体与ZZ结合，将FITC标记的GLase-ZZ导入EGFR过表达的细胞中，细胞内的荧光强度显著高于没有靶向抗体的对照细胞；利用荧光素酶的底物腔肠素（coelenterazine）在发光显微镜下检测到了发光的细胞。利用巯基化的GLase-ZZ融合蛋白与含硼脂质体上的马来酰亚胺活性基团反应，柱层析和 Western blotting 结果表明GLase-ZZ连接到了脂质体上，并具有与抗体连接的能力。细胞实验结果表明，双功能脂质体能够成功地将包被在脂质体中的荧光染料和BSH导入到细胞中，并能使细胞发光。动物实验中，成功建立了神经胶质瘤的裸鼠模型，通过尾静脉注射双功能脂质体后，利用肿瘤内直接注射底物检测到了发光反应。 在硼载体的设计方面，我们利用细胞穿膜肽连接的BSH,成功地将BSH导入到神经胶质瘤细胞中并获得了很高的硼传输效率。在发光元件的优化上，我们采用高强度和稳定的量子点QDs与脂质体相连，并利用抗体介导在细胞中观察到了QDs的荧光。 本课题共发表了研究论文8篇， 其中Sci论文4篇。培养研究生五名。参加国际会议一次，邀请日本冈山大学两位教授来中国进行短期访问。出国短期合作研究一次，与北京凯佰特公司建立了合作关系。