中文摘要：

肾小管上皮细胞(PTC)间质转化（EMT）和凋亡是肾小管间质纤维化的重要病理基础。我们发现miR-30是PTC中丰度最高的miRNA；在我们建立的TGF-β1诱导EMT、凋亡模型及肾小管间质纤维化动物模型中，miR-30表达明显下调，但其对肾小管间质纤维化的调控机制还不清楚。生物信息学分析发现促EMT基因snail，slug，ZEB2和促凋亡基因p53，bim均是miR-30的候选靶基因。那么，miR-30是否通过上述靶基因介导EMT和凋亡，从而参与调控肾小管间质纤维化的发生发展？本研究拟采用报告基因、原位杂交、激光共聚焦等分子和细胞生物学方法,获得miR-30直接调控上述靶基因介导PTC间质转化和凋亡的可靠证据，并在动物模型和临床病例中明确其对肾小管间质纤维化发生的关键作用。本项目有望揭示miRNA调控肾小管间质纤维化新的分子机制, 为确立miR-30作为该病的治疗新靶点提供科学依据。

结论摘要：

肾小管上皮细胞(PTC)间质转化（EMT）和凋亡是肾小管间质纤维化的重要病理基础。本研究以肾小管上皮细胞（HK-2细胞）为研究对象，通过大规模测序技术等分子和细胞生物学方法, 对TGF-β1诱导HK-2细胞发生EMT过程中的miRNA表达谱进行系统的鉴定，总结出TGF-β1诱导后miRNA表达谱的整体变化规律。在此基础上，对差异表达miRNA进行了功能分析,进一步探索了高丰度miRNA的作用机制,获得miR-30等直接调控snail，slug等靶基因、介导PTC 间质转化的可靠证据，并在动物模型和临床病例中明确其对肾小管间质纤维化发生的关键作用。本项目系统地揭示肾小管上皮细胞间质转化中miRNA变化规律及调控分子机制，为阐明miRNA在肾小管间质纤维化过程中的作用提供科学依据。同时，项目在建立解析人类miRNA功能及转录调控的信息及分析技术等方面也取得重要进展。