中文摘要：

该项目以我国重要农业害虫甜菜夜蛾中肠围食膜为主要研究对象，分析其蛋白质的组成并分离鉴定中肠新靶标蛋白。构建了高质量的甜菜夜蛾中肠cDNA表达文库；完成中肠围食膜蛋白高效价抗血清的制备；应用抗体免疫筛选法及RACE技术，克隆了甜菜夜蛾围食膜蛋白基因SeCBP66、SeM-8以及羧酯酶基因SeC1的cDNA序列（GenBank登录号分别为EU047712、GU255994和EF580101），其可译框架长度分别为1806bp、2703bp和1605bp，编码蛋白的预测分子量分别为64.2kD、95.7kD和60.0kDa；分别在大肠杆菌和昆虫细胞中成功表达了重组蛋白SeCBP66和SeM-8和SeC1。几丁质结合实验表明SeCBP66蛋白具有几丁质结合能力；免疫定位研究发现SeM-8粘蛋白在甜菜夜蛾卵期围食膜形成时就存在，定位在中肠和围食膜上；RNAi基因沉默实验直接证明了SeM-8蛋白参与了甜菜夜蛾中肠围食膜的生成。甜菜夜蛾围食膜新靶标蛋白SeCBP66和SeM-8的鉴定，在理论上填补了昆虫生理生化领域的空白，在实践上为甜菜夜蛾生物防治提供新途径，也可为转基因抗虫植物提供新基因来源。