本项目基于"变废为宝"的理念,选择海洋生物加工副产品蛋白资源为研究对象,采用酶工程技术协同色谱、质谱分析技术研究鱼鳞胶原降压肽的酶解机制;同时针对目前降压肽研发中出现的产品稳定性差、降压肽活性低等问题,以海洋胶原降压肽的酶解作用机制为研究目标,力求创新,构建酶解产物多肽释放动力学模型,预测不同酶解条件下,酶解产物中各多肽的含量。同时,构建酶解产物多肽活性预测动力学模型,预测不同酶解条件下,酶解产物多肽的生物活性;结合胶原蛋白的断裂位点、胶原降压肽活性与组分的关系等方面的研究,从生物化学、化学计量学等角度探讨并揭示蛋白酶酶解底物蛋白制备活性肽的模式和机制,为活性肽药物、保健品的研究与开发提供重要的理论依据与技术方法,对海洋生态资源的维护和海洋药物、保健品的药源的保障具有重要的意义。
enzymatic mechanism;protease digestion of collagen α1;protease digestion of collagen α2;cleavage position;model
本项目选择鱼鳞胶原蛋白为研究对象,研究鱼鳞胶原降压肽的酶解机制。采用酶工程技术协同色谱、质谱分析技术,构建α1 -蛋白酶和α2 -蛋白酶的酶解胶原蛋白的酶解体系,确定鱼鳞胶原蛋白的断裂位点。在此基础上,构建α1 -蛋白酶和α2 -蛋白酶2套胶原蛋白酶解产物多肽释放动力学模型,预测不同酶解条件下,酶解产物中各多肽的含量和分子量。构建酶解产物多肽活性预测动力学模型1套,预测不同酶解条件下,酶解产物多肽的降压活性。同时,本项目确定分子量和电荷是降压活性的重要因素。在此基础上,本项目将上述的动力学模型应用于鱼鳞降压肽研发,研发获得降压肽样品2种,产品的生物活性优于日本降压肽。因此本项目研究为活性肽药物、保健品的研究具有重要的意义。?