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同位素标记实验考察脱氮假单胞菌的甜菜碱代谢机制与微观代谢通量分析
  • 项目名称:同位素标记实验考察脱氮假单胞菌的甜菜碱代谢机制与微观代谢通量分析
  • 项目类别:青年科学基金项目
  • 批准号:31200024
  • 申请代码:C010201
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2013-01-01-2015-12-31
  • 项目负责人:王泽建
  • 依托单位:华东理工大学
  • 批准年度:2012
中文摘要:

甜菜碱对脱氮假单胞菌维生素B12生产过程影响显著,然而其代谢机理很难通过已有的在基因、酶学和发酵环境代谢组上的研究结论进行阐明。本课题将通过在发酵过程中补加13C标记底物甜菜碱的代谢考察实验,在利用13C同位素代谢软件FiatFlux和13C-FLUX理论进行GC/MS和LC/MS数据分析的基础上,结合酶活和mRNA数据阐明甜菜碱在工业VB12发酵过程中的代谢机制。首先通过以特定标记的甜菜碱进行代谢实验,阐明甜菜碱在菌体生长期和产物合成期的分解代谢去向和代谢机制,构建代谢途径网络;然后根据不同13C标记模式的葡萄糖和甜菜碱组合实验,阐明甜菜碱对生产菌中心碳代谢和维生素B12合成代谢的作用机理,其对VB12生物合成代谢途径中的瓶颈节点及代谢调控具有重大意义。该方法对其它工业发酵过程底物代谢的研究也具有很好的借鉴作用。

结论摘要:

英文主题词Pseudomonas denitrificans;13C labelling experiment;metabolic flux;vitamin B12;technology optimization


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