中文摘要：

骨关节炎(OA)是最常见的骨关节疾病，因尚无理想的药物治疗，探讨合理的药物靶点是目前研究热点。白介素-1（IL-1）和转化生长因子（TGF）在OA的病理过程中起重要作用，两者有相互拮抗作用。目前认为ERK1/2是IL-1介导OA的重要药物靶点。TGF通过Smad和ERK1/2信号通路发挥对软骨基质保护作用，而Smad激活还依赖于ERK1/2。因此，以ERK1/2为OA的药物靶点会弱化TGF的上述效应。本项目拟用ERK1/2抑制剂（U0126）阻断软骨细胞中ERK1/2，通过检测下游相应蛋白表达，明确ERK1/2对TGF上述效应的影响。再用RNA干扰和基因克隆技术在ERK1和2中筛选出影响较小的亚型，并检测Smad对此ERK亚型的依赖性来探讨其可能机制。最后在体内进一步进行验证。结合我们前期研究发现抑制ERK1或2均能减轻IL-1诱导软骨基质降解，为OA治疗选择更合理的药物靶点提供理论依据。

结论摘要：

ERK1/2在IL-1β介导的骨关节炎中具有重要作用，ERK1和2亚型在此过程中均扮演同等重要的角色。在骨关节炎病理过程中TGFβ与IL-1β中间有相互拮抗作用。TGFβ能通过ERK1/2和Smad2/3信号通路对软骨组织进行保护作用。本项目对抑制ERK1/2及其亚型在TGFβ诱导软骨基质合成及抑制其降解的影响进行较为深入研究。首先采用SB525334(TGFβI型受体抑制剂)、PD98059（ERK1/2特异性抑制剂）及SIS3（Smad3磷酸化抑制剂），分别探讨ERK1/2及Smad2/3信号通路在TGFβ诱导软骨基质合成及抑制其降解中的作用及ERK1/2对Smad2/3信号通路的影响。结果显示ERK1/2和Smad2/3均具有重要作用，而且ERK1/2是通过进一步激活Smad2/3发挥作用。其次我们采用RNA干扰技术，探讨ERK1和2亚型对TGFβ通过Smad2/3信号通路诱导软骨基质合成及抑制其降解的影响。结果显示沉默ERK1亚型能显著抑制p-Smad3磷酸化水平，从而减弱TGFβ诱导软骨基质合成及抑制其降解的作用，而沉默ERK2亚型不能产生上述效应。最后，在体内进一步探讨ERK1和2亚型分别对大鼠软骨基质退变的影响。经形态学观察初步证实，ERK2亚型对大鼠软骨组织退变影响较小。对研究结果分析发现以ERK2作为骨关节炎治疗的药物靶点更为合理。