中文摘要：

肺动脉高压（PAH）临床常见。缺氧性肺血管收缩（HPV）是PAH的早期组分，机制未明，既往研究多集中在肺动脉，但肺静脉（IPV）可能是感受缺氧的更合理部位。我们前期研究发现瞬间受体电位通道蛋白(TRPC)6在磷酸腺苷激活的蛋白激酶（AMPK）的调节下，使低氧诱导的人肺动脉平滑肌细胞中通过电压门控钙离子通道的钙离子内流进一步增加导致HPV；预实验发现IPV在缺氧刺激时表现出与肺动脉(IPA)不同的收缩特征。我们推测IPV在缺氧时会产生不同于IPA的收缩特点；IPV是肺循环缺氧反应的真正位点，是介导HPV的主要因素；TRPC在缺氧性IPV收缩中起重要作用。本研究采用生理实验与电化学途径相结合的方法，从等张张力测定、细胞内钙离子浓度及膜电位检测、TRPC及储存钙在IPV缺氧反应中的作用三个方面来验证我们的假说。使我们能更好地理解IPV在HPV以及PAH中的作用，为临床治疗PAH提供一条新的途径。

结论摘要：

肺动脉高压（PAH）是临床常见病严重危害人类健康，其机制尚未完全清楚。2010年我们证明瞬间受体电位通道蛋白6（TRPC6）在缺氧引起的肺动脉平滑肌细胞（PASMC）[Ca2+]i升高中起重要作用。由于肺静脉同样是引起肺循环阻力的一部分，本课题分别针对远端肺静脉（IPV）重构，远端肺动脉（IPA）收缩和重构在PAH发病机制及寻找新的治疗靶点进行研究。 本课题创新点在于发现或揭示了1）IPV方面: a）80mM的高钾诱发了IPV的自发性收缩，IPV对于缺氧的反应相对于IPA小，在不同氧分压下（1%,3%,5%,8%）表现出不同张力。b）慢性缺氧诱导的肺动脉高压（CHPH）大鼠IPV和低氧培养的PVSMC TRPC6表达升高。c）TRPC6阻断剂和TRPC6基因敲除均抑制低氧诱导的PVSMC [Ca2+]i升高和低氧培养时PVSMC迁移。d）低氧诱导的PVSMC [Ca2+]i升高是通过phospholipase C和AMPK介导的。2）IPA方面e）前列腺素E2（PGE2）造成IPA收缩机制是通过EP4受体，胞内cAMP具有双重调控血管张力作用。f）地高辛通过降低CDK4、CDK6 蛋白的表达水平，上调p27kip1蛋白表达，抑制低氧诱导的人肺动脉平滑肌细胞增殖。g）地高辛早期应用可延缓低氧诱导的大鼠PAH形成及肺血管重构，该作用可能是通过抑制肺动脉平滑肌细胞增殖、迁移、表型转换和MMPs分泌而起作用。 本课题证实了TRPC6在PVSMC增殖、迁移上起重要作用，参与IPV重构；地高新抑制缺氧诱导的PASMC增殖、迁移和PAH大鼠肺血管重构；以及前列腺素引起IPA收缩的分子机制。这些研究为PAH的治疗提供新的思路。