中文摘要：

探索促进脑缺血后神经干细胞增殖的方法具有重大的现实意义。研究证实miRNA参与了调控神经干细胞的增殖。我们研究也证实重复经颅磁刺激（rTMS）能促进脑缺血后神经干细胞增殖。综合以上研究结果，我们提出rTMS改变了脑缺血后脑组织中miR-106b家族的表达，以调控与神经干细胞增殖有关基因p21、p57和PTEN的转录，从而促进神经再生和功能恢复的理论假设。本项目应用原位杂交及分子生物学等技术手段，探讨rTMS治疗MCAO模型后神经干细胞的增殖规律、脑组织中miR-106b家族的表达规律和p21、p57和PTEN等靶基因表达的变化规律，观察rTMS治疗后miR-106b家族的表达与靶基因表达之间的变化关系，以期证实rTMS促进脑缺血后神经细胞再生的机制之一是通过miRNA-靶基因-细胞周期-神经干细胞增殖途径来实现的，为完善、丰富rTMS治疗脑缺血的作用机理提供科学实验依据。

结论摘要：

目的探讨miR-106b家族在重复经颅磁刺激（rTMS）促进脑缺血后神经干细胞增殖中的作用。方法以大脑中动脉栓塞模型为研究对象，（1）给予不同频率的rTMS治疗，在不同时间点观察rTMS对脑缺血SVZ区神经干细胞增殖的影响，获取最佳的实验参数；（2）采用定量荧光PCR检测10Hz rTMS对脑缺血脑组织中miR-106b家族的表达的影响；（3）通过miRNA基因芯片分析了解rTMS对脑缺血脑组织可能影响的miRNA；（4）利用Western blot检测10Hz rTMS对脑缺血脑组织中miR-106b家族相关靶蛋白p21、p57和PTEN的表达影响；（5）通过大脑中动脉栓塞前进行侧脑室注射不同剂量的miR-25抑制剂，采用定量荧光PCR检测10Hz rTMS治疗对脑缺血脑组织miR-106b家族表达的影响，筛选出最佳给药浓度；（6）大脑中动脉栓塞前侧脑室注射2.5nmol的miR-25抑制剂，利用Western blot和免疫荧光组织化学检测脑缺血脑组织miR-106b家族相关下游靶蛋白p21、p57的表达变化及脑缺血SVZ区神经干细胞增殖之间的关系。结果大脑中动脉栓塞后即予以连续7d，10Hz重复经颅磁刺激可以（1）促进脑缺血SVZ区神经干细胞的增殖；（2）促进脑缺血大鼠脑组织中miR-106b家族各成员的表达；（3）显著降低脑缺血脑组织中miR-106b家族相关靶蛋白p21、p57的表达；（4）侧脑室注射2.5nmol miR-25抑制剂可以显著抑制miR-25的表达，且不影响家族其他成员的表达；（5）侧脑室注射2.5nmol miR-25抑制剂后，p57表达升高，而p21表达无明显差异；（6）miR-25被抑制后脑缺血大鼠SVZ区神经干细胞增殖受到抑制。结论（1）10 Hz rTMS可促进脑缺血后神经干细胞增殖，且 miR-106b家族参与了这种效应；（2）10 Hz rTMS促进脑缺血后SVZ区神经干细胞增殖的机制之一是通过促进miR-25的表达来抑制相关靶蛋白p57的表达，从而促进脑缺血后神经干细胞的增殖。