通过厚皮甜瓜雄花、两性花同株(aaGG)与雌、雄异花同株(AAGG)基因型间杂交,获得1000株F2的构图群体,采用BSA策略和PCR为基础的标记技术,对控制厚皮甜瓜雌、雄异花同株花性型基因A进行分子标记和精细定位,并构图甜瓜的高饱和连锁图谱。将筛选出的与A基紧密连锁的标记用于回交转育的标记辅助选择,培育"AAGG"基因型自交系,筛选强优势组合。通过对A基因的精细构图,将为A基因的图位克隆奠定基础;在通过回交培育AAGG型自交系的同时,也就培育了轮回亲本"aaGG"的近等基因系"AAGG",为从表达水平克隆与花性型相关的基因奠定了基础;A基因的克隆,可以从分子水平研究葫芦科雌花和两性花中雄蕊的发生与发育机理。高饱和连锁图谱将为甜瓜结构基因组学和葫芦科比较基因组学研究提供必备的工具。
用1000多对AFLP标记(560对EcoRI-MseI和448个PstI-MseI)引物组合、320对SRAP引物组合、100个ISSR引物和20多个SSR,筛选了A_、aa基因池和A近等基因系,共筛选出1个SRAP标记ME9OD15和1个AFLP标记P36M84与控制甜瓜雌雄异花同株基因A连锁的分子标记,距目的基因分别为9.5和12.7 cM,距预定目标尚有很大差距,关键是在项目执行过程中AFLP系统表现出出人意料的不稳定性,后经反复优化才使系统稳定下来,但严重延误了项目的进度。项目组培育出1个高质量的雌雄异花同株近等基因系,农艺性状遗传稳定,448个AFLP引物组合对近等基因系和轮回亲本进行分析显示,近等基因系与轮回亲本的近等性达到了99.73﹪,高于无选择下推算的理论值99.21875﹪。项目组培育甜瓜新品种1个,2006年通过了上海市品种审定委员会审定,在上海累计示范推广13多公顷。新构建一个F2群体,双亲间有高度多态性,用173对AFLP引物筛选出542个多态性标记,可用这些标记构建一个较高密度的图谱,并记载了株高等6个动态性质,为动态性状研究奠定了基础。