肿瘤是一种常见病、多发病,又是对人类健康和生命安全威胁极大的一种疾病。肿瘤分为良性和恶性两类,恶性肿瘤被称为"癌",由于死亡率极高,又无根治的方法,所以常使人们谈癌色变。国内外对芦笋防癌抗癌的药用研究有许多报道。现代科学研究证实芦笋的防癌抗癌功效确切、显著,但对其作用机制阐述并不明确。而且,目前的实验多采用芦笋原汁或芦笋提取液来进行抗肿瘤作用研究,芦笋中含有多糖、皂甙、组织蛋白、微量元素等多种有效成分,但就其抗癌的具体成分及其作用机制还未见报道。为了进一步明确芦笋抗癌的有效成分及其抗癌作用机制,本课题就芦笋中的多糖、皂甙两种主要抗肿瘤成分进行比较研究,并欲通过体内免疫实验、体外细胞凋亡及DNA拓扑异构酶等方面进行实验研究,有利于进一步的新药研发和临床应用。
课题针对芦笋中的多糖、皂甙两种主要抗肿瘤成分进行比较研究,阐明各组分抗肿瘤的主要作用机制。唾液酸是血型糖蛋白A发挥功能的重要因素之一,利用化学比色法测定了芦笋多糖对S180小鼠红细胞膜唾液酸含量的影响。为进一步明确其对血型糖蛋白A和带3蛋白的影响,应用SDS-PAGE分离膜蛋白并采用过碘酸-schiff试剂和考马斯亮蓝染色,测定红细胞膜血型糖蛋白A和带3蛋白的相对含量。利用CI-对MQAE的荧光淬灭作用,采用荧光分光光度法检测红细胞膜带3蛋白的阴离子转运功能。由于膜电位可以影响阴离子交换蛋白的作用位点在膜两侧的分布而间接影响阴离子的跨膜转运,应用流式细胞仪观察了芦笋多糖对S180小鼠红细胞膜电位的影响。抗体结合流式细胞仪测定S180小鼠红细胞CR1数量,红细胞免疫花环试验考察了CR1活性。采用MTT 法对芦笋皂苷进行体外筛选,进一步运用流式细胞仪研究芦笋皂苷诱导SGC-7901 和HepG-2 细胞凋亡作用、肿瘤细胞周期、细胞内活性氧含量变化和线粒体膜电位的影响;运用激光扫描共聚焦显微镜观察肿瘤细胞内Ca2+浓度的变化,阐明了芦笋皂苷诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制。