利用成年大鼠视神经切断损伤模型,向玻璃体腔内注射携带BDNF-GFP的质粒,电致孔法促进基因转染率,改善损伤后神经节细胞的生存率,延长其生存时间;同时,以改良的人工视神经鞘(聚乳酸中空纤维管内灌注以各类神经营养素基因修饰雪旺细胞等),搭桥于视神经眼球侧断端和对侧上丘之间,以期促进轴索再生,并引导轴索伸长到达上丘的靶细胞,建立有效的突触联系,最终恢复视觉功能。本研究不仅为青光眼,视神经病变提供了根本
本项目成功构建了BDNF-GFP和CNTF-GFP两种质粒,以成年大鼠视神经切断为动物损伤模型,向玻璃体腔内注射携带上述基因的质粒,电穿孔法促进基因转染,改善损伤后神经节细胞的生存力;同时,以改良的人工视神经(PLGA导管内灌注以CNTF基因修饰的雪旺细胞和ECM)移植在视神经球侧断端,短导管游离于皮下,长导管搭桥于对侧上丘,观察轴索再生状况。实验发现电穿孔方法不仅可以辅助基因转染培养的雪旺细胞,还可以辅助注射在玻璃体腔内的基因转染视网膜神经节细胞;CNTF基因修饰的雪旺细胞能够种植在PLGA导管纤维间隙,并且在移植后,通过荧光标染、电镜检查和免疫组化染色方法等,观察到了视神经的明显再生现象。