中文摘要：

胆固醇－磷脂泡的聚集、融合是胆石形成的关键步骤,关于胆汁泡融合的时空特征及其调控机制尚未完全阐明。既往筛选和鉴定成核效应蛋白绝大部分是借助常规理化技术针对单个蛋白质，但胆汁成分异常复杂，蛋白有多种来源，如此筛选和鉴定胆石形成中的关键蛋白事倍功半。本项目采用蛋白质学及分子生物学等技术，利用不同人群来源的胆汁标本和体外模拟胆汁体系，建立正常人群和胆固醇性结石患者胆汁、微胶粒相和泡相蛋白质表达谱。完成不同人群来源或模拟的胆汁，微胶粒相和泡相样品制备，及蛋白质样品的2-DE，MS，数据库检索、分析；通过免疫组织化学验证了HSA、RBP、CRT、PFN和TPM这5种差异表达蛋白质在胆固醇结石患者和正常人胆囊组织中的表达，运用Western Blot验证差异蛋白质在胆固醇结石组和正常对照组胆囊胆汁中和在胆固醇结石患者胆汁泡相和微胶粒相中的差异完成了不同人群来源胆囊组织的蛋白质样品制备，完成蛋白质样品的2-DE，MS。并对RBP的成核活性进行了检测。完成了通过免疫组织化学验证了HSA、RBP、CRT、PFN 和TPM 这5 种差异表达蛋白质在胆固醇结石患者和正常人胆囊组织中的表达，并验证其成核活性。