本项目将完善国家植物基因研究中心(北京)植物激素检测平台的服务功能,提高检测分析技术水平。优化平台先期建立的IAA、JA、ABA、SA等植物激素定量分析方法,确定不同种类植物激素在水稻和拟南芥在不同生长时期、不同组织部位取材检测的最佳条件,为生物学家的实验设计和取材提供依据,以获得更加稳定可靠的数据;加强与生物学家的合作,建立能同时定量分析多种植物激素的分析方法,为遗传学家深入研究植物激素互作机理提供技术支持;通过开发有效前处理方法和衍生化等手段,进一步提高IAA分析方法的灵敏度,降低植物材料用量(20-50 mg鲜重),满足实际应用中特殊材料、特殊部位取材困难的需求。
plant hormones;quantative analysis;auxin;brassinosteroids;platform
植物激素是植物体内合成的一系列结构不同的小分子天然化合物,作为重要的信号分子,在极低的浓度下,能够参与并调控植物的整个生长发育过程。由于含量低、基质复杂等原因,高灵敏度植物激素的定量分析一直是难以解决的瓶颈问题。在前期建设的基础上,我们从以下几个方面改善了国家植物基因研究中心(北京)植物激素检测平台的服务功能,并提高了检测分析技术水平。(1)通过衍生化技术,大幅度提高了生长素(IAA)检测方法的灵敏度,将植物材料的用量降低至10-15mg鲜重,以满足实际应用中特殊材料、特殊部位取材困难的需求。(2)建立了能够同时定量分析多种类植物激素(IAA、ABA、SA、JA、IP、IPR、ZR)的分析方法,为生物学家研究多种植物激素互作提供了有利的技术支持。(3)采用MAX-MCX混合离子交换固相萃取和衍生化相结合的策略,建立了油菜素内酯(BRs)的定量分析方法,攻克了BRs定量分析的难题。(4)测定了水稻和拟南芥材料在不同生长时期、不同组织部位取材检测的植物激素含量,为生物学家的实验设计和材料选取提供了数据支持。(5)植物激素平台已经为承担国家重大研究计划及转基因专项等科技任务的科学家提供了近5000份高质量的数据,并建立了良好的合作关系。在本项目的支持下,我们所建立的植物激素检测技术,为植物激素分子作用机理研究的深入提供了重要的技术保障。