中文摘要：

赤潮生物种群遗传学是赤潮发生机制研究的重要内容。微卫星标记分析和单细胞PCR是赤潮生物种群遗传学研究的重要工具，但其自身都存在不足。通过全基因组扩增技术整合微卫星标记和单细胞PCR技术，建立单细胞微卫星标记技术是赤潮生物种群遗传学研究的方向。近年来，塔玛亚历山大藻导致我国黄渤海贝类麻痹贝毒严重超标，而对于该海域塔玛亚历山大藻种群遗传多样性、遗传结构、基因流等资料知之甚少。本项目拟以塔玛亚历山大藻为材料，开发基因组微卫星标记，建立微卫星标记分析方法；建立塔玛藻单细胞全基因组扩增方法，并以其为桥梁，整合微卫星标记分析和单细胞PCR技术，建立塔玛藻单细胞微卫星标记分析技术；搭载国家海洋局趋势性监测项目采集我国黄渤海塔玛藻，单细胞微卫星标记技术分析其种群遗传结构，提供我国黄渤海塔玛藻遗传多样性、种群遗传结构、地理种群间基因流等基础数据资料，为塔玛藻赤潮发生机制研究、赤潮监测提供技术支持和基础数据。

结论摘要：

采用FIASCO（Fast Isolation by AFLP of Sequences Containing repeats site）方法富集、分离海洋有毒甲藻——塔玛亚历山大藻基因组DNA微卫星位点。测序分析的22个克隆中全部含有微卫星位点，插入片段大小为175-687bp，微卫星DNA的重复数最低4次，最高27次，平均11次；在全部的39个微卫星位点中，其中25个属于完美重复型，13个不完美重复型，1个复合型。设计合成塔玛亚历山大藻微卫星标记引物8对，其中6对引物能得到清晰的DNA产物条带。项目组采用TEM-PCR技术引物设计思路，针对这6个微卫星标记微点重新设计了PCR扩增引物，实现了单细胞塔玛亚历山大藻微卫星遗传标记的扩增。