国内外针对半抗原的手性抗体研究很少,基础工作非常缺乏。本项目围绕沙丁胺醇左旋异构体和消旋体开展了抗体制备、免疫识别特性、免疫分析方法研究。结果如下1)制备出沙丁胺醇左旋体两种衍生化半抗原,分别获取了针对左旋体和消旋体的单克隆抗体和兔多克隆抗体,首次发现沙丁胺醇抗体具有很强的手性选择性;2)从单克隆杂交瘤细胞出发,克隆抗体的全套基因,制备出沙丁胺醇scFv,进而同源模建的方法构建了沙丁胺醇消旋体scFv的三维模型,利用计算机分子模拟手段,建立了半抗原-抗体相互作用的分子的方法,通过结构-活性分析,发现消旋体抗体模型与两种手性对映异构体的分子对接模型相同;3)基于沙丁胺醇消旋体单克隆抗体,建立了酶联免疫分析方法、荧光偏振免疫分析、时间分辨免疫分析方法和化学发光酶免疫分析方法等4种免疫分析方法。其中ELISA方法已经开发成商品化试剂盒,在国内多地推广应用,为食品安全监管提供了一种有效的技术手段。
英文主题词salbutamol; ScFv; enantioselective; immunoassay