中文摘要：

炎症性肠病是一种肠道慢性炎性病变。其病因及发病机制尚不清楚，认为在环境、遗传和免疫反应的异常参与了IBD的发病。其中，肠道粘膜免疫反应的异常，特别是T细胞的异常活化和功能紊乱是IBD发生和持续的关键。T细胞的活化通常需要两个信号，除了第一信号TCR识别MHC-肽复合物外，还需要多种协同刺激分子作为第二信号的刺激。OX40/OX40L是一对重要的协同刺激分子。近年的研究表明OX40/OX40L的协同刺激作用在机体的免疫反应中起十分重要的作用。动物实验研究也已表明CD4+OX40+T细胞在实验性动物炎性肠病中发挥重要作用，但有关IBD患者OX40的研究却很少见有报道。本项目是研究CD4+T表达OX40的水平，分析CD4+OX40+T细胞的免疫表型及生物免疫学功能，揭示CD4+OX40+T细胞在IBD发病机制中的重要作用，为寻找IBD新的有效治疗方法提供理论依据。

结论摘要：

炎症性肠病（IBD）是一种肠道慢性炎性病变，发病机制尚不清楚。研究认为肠道粘膜免疫反应的异常，特别是T细胞的异常活化和功能紊乱是IBD发生和持续的关键。在T细胞的活化过程中，除了第一信号TCR识别MHC-肽复合物外，多种协同刺激分子作为第二信号的刺激对于T细胞的活化至关重要。研究表明OX40/OX40L的协同刺激作用在机体的免疫反应中起十分重要的作用，但有关IBD患者OX40的研究却很少见有报道。在国家自然科学基金的资助下，本项目研究了IBD患者CD4+OX40+T细胞的分布及免疫表型、生物免疫学功能，取得了如下研究成果（1）成功分离并体外培养肠粘膜固有层单核细胞（LPMCs）。（2）通过流式细胞法、实时定量PCR、以及western blot方法分析发现，IBD患者病变部位LPMC中CD4+T细胞表达OX40水平较IBD患者和健康人外周血CD4+T细胞显著升高。（3）IBD患者病变部位CD4+OX40+T细胞表面CD45、CD40L表达显著升高，并且抗凋亡分子Bcl-2、FLIP表达显著上调，提示病变部位CD4+OX40+T细胞处于过度活化状态，并且具有抵抗凋亡的特性。（4）通过体外细胞共培养实验，我们发现在刺激剂或者抗原提呈细胞存在的条件下，CD4+OX40+T细胞增生程度显著高于CD4+OX40-T细胞；并且在培养的同时，加入抗OX40单抗能够显著促进CD4+OX40+T细胞增殖，而抗OX40L单抗则能够抑制CD4+OX40+T细胞增生。（5）体外培养的病变部位CD4+OX40+T细胞分泌促炎性细胞因子IFN-γ和TNF-α的水平明显升高，并且抗OX40单抗能够促进病变部位CD4+OX40+T细胞分泌IFN-γ和TNF-α；然而抗OX40L单抗则能明显抑制CD4+OX40+T细胞分泌IFN-γ和TNF-α。总之，本研究证实IBD患者肠粘膜病变部位存在大量的CD4+OX40+T细胞，该细胞群具有抵抗凋亡、过度活化的特征，并且能够分泌高水平的促炎性细胞因子；提示CD4+OX40+T细胞在IBD发病机制中起重要作用，进一步研究针对OX40/OX40L的靶向治疗药物，有望找到IBD新的有效治疗方法。本项目研究结果已经整理总结并撰写成论文，已投稿至Inflammatory Bowel Diseases杂志（IF: 4.46）。