中文摘要：

目前临床上对于嗅觉功能障碍一般都经验性地采用类固醇激素治疗，但对其作用机制尚不清楚，有实验表明类固醇激素的作用机制除了抗炎、减轻水肿，改善通气以外，仍可能存在其它途径。环核苷酸门控通道（CNG）是脊椎动物感觉信号转导途径中的重要环节，嗅感觉神经元上已发现有CNG通道，它们的功能是反应于嗅感觉神经元内的cAMP，参与气味信号转导为电信号的过程。本研究拟从这一通道着手，利用分子生物学和膜片钳技术，将CNG通道克隆，转染至HEK-293细胞，然后通过胞内或胞外途径给予类固醇激素，同时改变胞内的cAMP水平，观察对CNG通道电流的影响以及其作用方式和途径，从分子水平验证类固醇激素治疗嗅觉功能障碍的疗效机制，为临床应用提供理论依据。

结论摘要：

本研究利用分子生物学技术将环核苷酸门控通道（clclic nucleotide-gate channel,CNG channel）亚基CNGA2克隆转染至HEK-293细胞，采用实时荧光定量RT-PCR方法，酶联免疫吸附实验，激光扫描共聚焦显微镜荧光探针钙离子成像技术，观察类固醇激素对大鼠嗅感觉神经元（olfactory receptor neurons, ORNs）环核苷酸门控通道CNG channel）的影响。研究发现类固醇激素可以通过基因组效应使CNGA2亚基mRNA表达明显上调。 CNG通道是一种对cAMP敏感的配体门控通道，cAMP可以直接激活它。类固醇激素通过非基因组效应作用于AC，使cAMP的生成增多，进而影响嗅觉信号的转导过程。对急性分离的ORNs加入类固醇激素后，除因激光扫描对细胞内的荧光有一定的淬灭作用外，ORNs内[Ca2+]i没有显著变化，推测类固醇激素对CNG通道没有直接的激活作用。本课题通过研究类固醇激素对大鼠嗅感觉神经元CNG通道的作用，探讨激素治疗嗅觉障碍的可能机制。