中文摘要：

食线虫真菌被毛孢是重要的线虫内寄生菌,具有极大的生防潜力,丝氨酸蛋白酶是真菌对无脊椎动物致病关键因子,本研究是在分离和纯化被毛孢菌株OWVT-1丝氨酸蛋白酶(HR),并证明其对线虫作用的基础上,利用RACE的方法从总RNA中克隆和分离丝氨酸蛋白酶HR的基因。同时建立被毛孢OWVT-1的遗传转化体系，通过对hr基因进行功能获得和缺失性分析、测定转化子对线虫的生物学功能，明确hr基因在被毛孢OWVT-1侵染线虫过程中的功能，在分子水平上分析被毛孢OWVT-1优良生防性状的遗传特性和探索食线虫真菌－线虫相互作用的分子机制,具有重要的利用意义。同时获得的基因资源为进一步构建高毒力工程菌株提供了材料,为研制防治线虫的新型高效生物制剂提供基础，具有重要的实用价值。

结论摘要：

线虫内寄生真菌洛斯里被毛孢OWVT-1（Hirsutella rhossiliensis OWVT-1），温室自然土防治试验表明其对大豆胞囊线虫的防治效果稳定在90％以上，极具生防应用前景。食线虫真菌在穿透并有效突破寄主屏障过程中，丝氨酸蛋白酶起着重要作用。本实验室从OWVT-1菌株中分离得到两个丝氨酸蛋白酶（中性和碱性蛋白酶），并对其各项理化性质进行了研究。生测结果表明两个蛋白酶都能杀死线虫和降解其体壁蛋白。在测定蛋白酶N端氨基酸序列的基础上，克隆分离了碱性蛋白酶基因。建立了洛斯里被毛孢的遗传转化体系，构建了碱性蛋白酶基因的过量表达和敲除载体，并进行了转化，为下一步的基因功能分析打下了良好的基础。