本项研究的主要目的是通过对木质素合成途径关键酶基因4-香豆素辅酶A连接酶(4CL)基因家族各成员对木本植物(杨树)苯丙烷衍生物(如木质素)的生物合成的调控机制进行研究。结果发现,在杨树中存在5个不同的4CL基因(4CL1-4CL5),从毛白杨中分别克隆得到这五个4CL基因的基因序列与启动子序列。利用原核表达系统在E. coli分别表达、纯化5个4CL蛋白。对所纯化的4CL蛋白进行酶生化特性分析,结果显示,这5个4CL基因对4-香豆酸、阿魏酸、咖啡酸均存在明显的催化活性,但对肉桂酸、芥子酸没有活性。将5个4CL启动子分别构建转基因表达载体并通过农杆菌介导法转化烟草,结果发现五个4CL启动子驱动的GUS报告基因在烟草中存在组织特异性表达。以上研究表明4CL基因在杨树中以一个小基因家族的形式存在,这些4CL基因在体外生化功能方面不存在明显的分化,但在体内具有不同的表达调控模式,从而参与不同苯丙烷衍生物生物合成的调控。
英文主题词lignin biosyntehsis; 4CL gene family; tissue-specfic expression; Populus