中文摘要：

在基因组中成簇出现的微核糖核酸，其功能特别引人关注。我们发现miR-302-367簇通过加速间充质-上皮转变促进了小鼠和人的体细胞重编程，但此簇参与重编程的作用靶点，以及其在胚胎干细胞中的调控网络尚未完全阐明。由于此前的功能缺失研究存在的局限，我们计划敲除该簇以直接推动上述研究。本项目中我们将从头设计并优化具有特异性切割功能的TALEN对，通过同源重组在人多能干细胞中对miR-302-367簇进行敲除。通过比较此簇敲除前后干细胞的变化，进一步阐明其靶点，并探讨其在干细胞多能性、分化及细胞增殖等方面的功能。我们已建立锌指核酸酶介导的人iPS细胞中基因靶向修复的平台，这将有助于本项目中TALEN介导的基因敲除。TALEN作为特定基因标记和操作的有力工具，在利用干细胞研究miRNA 等的基因功能、筛选与评价药物中都有潜在的应用价值。