本研究针对生产上危害大且较难防治的作物病害疫霉病(Phytophthora spp.)、枯萎病(Fusarium oxysporum)、炭疽病(Colletotrichum spp.)和目前农业生产上危害性大并对化学杀虫剂具有很强的耐药性、抗药性的甜菜夜蛾(Spodoptera exigna)、斜纹夜蛾(Prodenia litura)、棉铃虫(Heliothis armigera)等重要鳞翅目害虫,在已从植物体内分离筛选到具有良好防病、促生及内生谱广的植物内生细菌和从苏云金芽孢杆菌中分离筛选到高活性物质VIPs (营养期杀虫蛋白)及其基因的基础上,以内生细菌为受体,构建杀虫防病促生的多功能工程菌,利用内生细菌能主动进入植物体内并传导的特性,使外源杀虫基因表达产物能够在植物体内发挥作用。探索多功能生物农药防治植物病虫害的可行性,为"绿色食品"生产及农业可持续发展等,提供理论和实践依据。
本研究针对疫霉病(Phytophthora spp.)、枯萎病(Fusarium oxysporum)和炭疽病(Colletotrichum spp.)等农业生产上的重要病害,分离筛选获得了具有良好防病、内生和促生作用的内生芽孢杆菌BS-2和TB2菌株,同时针对农业生产上危害严重而且耐药性、抗药性强的夜蛾科害虫,也筛选获得了对斜纹夜蛾幼虫具有高活性的苏云金芽孢杆菌营养期杀虫蛋白(VIPs)基因。通过基因工程和细胞工程技术,成功地将从苏云金芽孢杆菌中分离到的对夜蛾科害虫有高活性的VIPs基因导入到内生细菌中,构建了杀虫、防病、促生、内生的多功能工程菌。工程菌表现稳定,在繁殖80代后仍没有检测到基因丢失现象;而且工程菌保持了内生细菌野生菌株原有的内生、促生和抑菌功能,在烟草和小白菜体内定殖菌量与野生菌株相当,对烟草的促生效果可达193%,抑菌带宽及防病效果与野生菌株没有显著差异;并表现出较高的杀虫活性,对小菜蛾幼虫具有65%的杀虫效果,对斜纹夜蛾二龄幼虫的效果可达66.7-100%。