中文摘要：

后发性白内障(PCO)是残留的晶状体上皮细胞（LEC）增殖引起的，而蛋白质的磷酸化调控是细胞增殖周期中最普遍、最重要的形式。本项目比较了人晶体上皮细胞系和原代细胞的细胞周期特性，提出了一种新的简便的原代细胞培养方法，便于对细胞系的实验结果进行验证；应用流式细胞仪成功分选获得不同细胞周期的活性细胞群，并对不同细胞周期的磷酸化蛋白进行了一系列的富集和免疫共沉淀，但结果不满意，多次改进实验方法并应用不同的磷酸化蛋白抗体后，仍未获得满意效果，将进一步探索富集和免疫共沉淀磷酸化蛋白的更好方法；细胞信号通路在细胞凋亡、增殖等过程中发挥着重要作用，我们发现持续氧化应激可降低晶体上皮细胞内TNFα诱导的I-κBα的磷酸化及NF-κB信号通路的激活，并证实其与持续氧化损伤造成的蛋白酶体通路的失活部分相关；负显性泛素K6W对蛋白酶体通路具有抑制作用，我们构建了负显性K6W 泛素腺病毒重组体，转染兔眼后引起晶体上皮细胞的α-SMA表达下调及后发性白内障的抑制，为进一步研发防治PCO的相关药物提供了新思路；同时我们对野生型及突变型γD-晶状体蛋白（CRYGD）蛋白的结构和功能进行了全面系统的生物信息学分析