弹状病毒是危害鱼类及多种水生动物的烈性、传染性病毒病原。申请者在已获得鳜鱼弹状病毒全基因组序列及多株单克隆抗体、以及对病毒免疫相关蛋白的抗原性进行初步分析的基础上,拟进行鱼类弹状病毒重组多表位肽的构建及免疫效应研究。利用单抗、生物信息学、肽扫描技术等对鳜鱼弹状病毒糖蛋白(G)与核蛋白(N)蛋白的T、B细胞抗原表位进行预测和筛选;然后将候选抗原表位基因经不同组合、串联,表位之间以柔性短肽进行间隔,获得多表位肽编码基因片段,分别构建原核与真核表达系统;进一步以纯化的多表位融合蛋白或重组真核表达质粒免疫鱼体,经攻毒实验测试不同多表位肽的免疫抗病效果,并从鱼体特异性抗体的效价、淋巴细胞增殖情况、以及免疫相关基因表达变化等方面,了解其诱导宿主的免疫应答作用,揭示免疫效应机制。通过上述研究,以期获得免疫原性强、可诱导高效免疫保护效果的多表位肽,从而为鱼类弹状病毒新型高效疫苗的研发提供候选抗原。
英文主题词Siniperca chuatsi rhabdovirus (SCRV);glycoprotein;nucleoprotein;multi-epitope peptides;immune response