中文摘要：

如何提高肿瘤细胞的放射敏感性是放射肿瘤学研究的重要内容。我们研究发现，抑制肿瘤细胞内的端粒酶活性可以实现放射增敏，但增敏效应产生较缓慢，并且，肿瘤细胞可以通过端粒延伸替代途径（ALT）来削弱其缩短端粒和放射增敏的作用。端粒是端粒酶和ALT途径的共同调节目标，有可能成为更有效、更广谱的治疗靶点。我们前期研究发现端粒在调控肿瘤细胞放射敏感性方面起着重要作用，而抑制端粒结合蛋白TPP1表达后能够导致肿瘤细胞的端粒缩短和放射敏感性增加。本项目旨在前期研究基础之上，通过基因沉默和过表达技术，研究TPP1在端粒酶阳性肿瘤细胞、ALT肿瘤细胞和正常细胞中对放射敏感性的影响及可能的机制，并且在细胞和动物实验水平评价抑制TPP1表达的放射增敏作用，探讨TPP1作为广谱抗肿瘤靶点的分子基础和可行性，为实施以TPP1为靶点的肿瘤放射增敏提供理论和实验依据。

结论摘要：

放射治疗是恶性肿瘤的主要治疗手段之一。端粒稳态是影响放射敏感性的重要因素。TPP1是端粒结合蛋白复合体（Sheherin）的重要成员，对端粒稳态维持起到重要作用。我们前期研究发现TPP1在放射抗拒细胞系中表达升高，但是TPP1对肿瘤细胞放射敏感性的确切影响和机制尚不明确。本课题主要利用基因干扰与基因过表达技术研究TPP1表达变化对肿瘤细胞放射敏感性的影响。首先我们发现TPP1蛋白表达水平与结直肠肿瘤细胞放射敏感性相关，即放射抗拒株中高表达，敏感株中低表达。其次，我们成功构建了干扰和过表达TPP1的细胞株。克隆形成实验表明，TPP1过表达则显著降低了肿瘤细胞的放射敏感性，而抑制TPP1表达显著增加了肿瘤细胞的放射敏感性。过表达TPP1降低了肿瘤细胞的放射诱导凋亡率，延长了放射诱导的G2-M期阻滞持续时间，促进了放射后DNA损伤修复，降低了肿瘤细胞放射敏感性。于此相反，干扰TPP1可以通过诱导端粒失稳态、促进辐射诱导凋亡和抑制DNA损伤修复等途径促进放射增敏。另外，我们发现端粒稳态是预测和调节肿瘤细胞放射敏感性的重要因素，端粒失稳态可以导致放射增敏。结论TPP1蛋白高表达与肿瘤细胞放射抗拒密切相关，TPP1可以通过影响端粒稳态进而调节肿瘤细胞放射敏感性，TPP1是肿瘤细胞放射增敏的潜在靶标。