中文摘要：

T细胞在某些自身免疫性疾病或组织器官移植排斥中起关键作用，目前临床广泛使用的免疫抑制剂缺乏特异性，具有显著抑制造血系统功能和对重要生命脏器毒性大的缺憾。我们新发现anisomycin显著抑制T细胞的生物学行为，其特点是剂量小，作用强，毒性低，无直接细胞毒作用和抑制作用可逆转，明显优于环孢霉素A。本项目利用正常和两种病理动物模型确定anisomycin体内抑制T细胞的作用及其疗效；利用原代T细胞和T细胞系，通过4种不同芯片技术，从相关176个基因的转录、mRNA、蛋白及功能水平，从345种转录因子和308种细胞因子水平，从45条信号通路上、中、下游水平探明anisomycin抑制T细胞增殖周期和诱导T细胞凋亡的信号调控机制；筛选起关键作用的靶分子，再采用anisomycin、靶分子的特异性阻断剂、激动剂、siRNA和靶基因过表达策略，结合T细胞行为和功能指标在T细胞上进一步确证靶分子的功能。

结论摘要：

本项目利用正常和两种病理动物模型确定anisomycin体内抑制T细胞的作用及其疗效；利用原代T细胞和T细胞系，通过4种不同芯片技术，从基因的转录、mRNA、蛋白及功能水平，从转录因子和细胞因子水平，从信号通路上、中、下游水平探索anisomycin抑制T细胞增殖周期和诱导T细胞凋亡的信号调控机制。结果表明，anisomycin通过抑制小鼠T细胞的增殖，阻滞细胞周期进入S期和G2/M期及其与周期调控蛋白的关系，减少T细胞的早期和中期活化，降低T细胞对同种异基因抗原刺激的应答，上调体内Treg和Th2型细胞因子，下调Th1型细胞因子，抑制小鼠DTH的发生，从而抑制同种异基因皮肤移植的排斥反应和实验性自身免疫性脑脊髓炎的炎症反应。E2F2在anisomycin诱导T细胞凋亡过程中与miRNA　let-7c相关联，JNK1/2 信号通过miRNA let-7c连接到 AP-1/STAT1/STAT3/Bim/Bcl-xL/Bax/Bak 信号通路，从而介导anisomycin诱导的T细胞凋亡。anisomycin还能抑制LPS激活NF-κB信号所诱导的小胶质细胞炎症反应，这可能与anisomycin下调小胶质细胞内Cxcl5、Mmp9、IL-6、TNF-α、p-NF-κB(p65)和上调IGFBP6有关，anisomycin 可能通过促进Cxcl5与IGFBP6的负反馈关联和抑制Cxcl5与Mmp9的正反馈关联而发挥抗炎作用。这些研究揭示了anisomycin抑制T细胞生物学行为及其细胞信号调控机制，预示在组织移植排斥和自身免疫反应性疾病方面存在较大的潜在应用前景。