中文摘要：

破骨细胞和成骨细胞间的ephrinB2/EphB4双向信号耦联，使破骨细胞被抑制的同时激活成骨细胞，提示了利用破骨细胞促进骨形成以治疗骨疾病、促进骨整合的新思路和新靶点（ephrinB2下游PDZ结构域蛋白质）。本项目目的即筛选出破骨细胞中参与ephrinB2/EphB4逆向信号转导的下游PDZ结构域蛋白，并进行筛选蛋白生物学功能的初步研究。本项目组证实RAW264.7细胞系可用作研究ephrinB2/EphB4双向信号耦联的破骨前体细胞模型；证明诱导分化的成熟破骨细胞表达8种PDZ结构域蛋白，但生理状况下，仅Dvl2与ephrinB2固有结合，提示Dvl2是内源性的ephrinB2/EphB4逆向信号转导下游PDZ结构域蛋白；成功构建Dvl2过表达载体和siRNA干扰载体，脂质体介导瞬时转染RAW264.7细胞，同期构建动物种植模型，但体内外实验尚未显示Dvl2的生物学效应，其原因可能是脂质体介导的瞬时转染效率较低。在今后的长期研究中，利用本项目创新性结果，可以采用药物压力筛选Dvl2稳定转染细胞株或构建siRNA病毒载体提高转染效率，继续体内外深入研究，为开发新靶点提供实验依据。