中文摘要：

本研究以黑素瘤特异性高表达的Melanoma-inhibiting activity(MIA)蛋白的转录调控序列（TRS）为调控元件，设计受其调控的胸苷激酶基因（tk）和胞嘧啶脱氨酶基因（cd）表达系统，用缺陷型腺病毒将该系统导入黑素瘤细胞后，特异性表达产生胸苷激酶和胞嘧啶脱氨酶，分别将前体药物丙氧鸟苷（GCV）和5氟胞嘧啶（5FC）转化形成细胞毒性药物，同时应用GM-CSF。给予前药GCV和5F

结论摘要：

本研究以黑素瘤特异性高表达的Melanoam-inhibiting activity(MIA)蛋白的转录调控序列(TRS)为调控元件，成功设计受其调控的胸苷激酶基因(tk)和胞嘧啶脱氨酶基因(cd)双自杀基因表达系统，用缺陷型腺病毒将该系统导入体外培养的黑素瘤细胞(A375和B16-F1)后，可特异性表达产生胸苷激酶和胞嘧啶脱氨酶，给予前体药物丙氧鸟苷(GCV)和5氟胞嘧啶(5FC)后，可以发现对黑素瘤细胞有显著的杀伤效应，并与病毒量和前体药物浓度有相关性。体外还可观察到该双自杀基因系统对黑素瘤细胞杀伤效应的"旁观者"效应。建立黑素瘤细胞（B16-F1）荷瘤鼠C57B6动物模型，用缺陷型腺病毒将该系统导入肿瘤中，分别通过尾静脉和腹腔给予前体药物后，可以观察到该系统对荷瘤动物模型肿瘤生长的抑制作用。在肿瘤动物模型中，联用GM-CSF和双自杀基因系统可显著提高对肿瘤细胞的杀伤作用。此外，本课题组还针对黑素瘤特异性高表达的MIA基因，筛选并构建了有效的siRNA系统，证明针对MIA基因和Survivin基因的siRNA对体外培养的人黑素瘤细胞A375增殖有显著的抑制作用。