中文摘要：

对已克隆的水稻病程相关蛋白基因OsPR-4b的启动子进行功能分析和顺式元件鉴定。构建OsPR-4b基因启动子功能分析的系列缺失体（和报道基因GUS融合），利用农杆菌介导法将含系列缺失体的双元载体转入烟草，获得转基因烟草并鉴定启动子中调控基因在抗病反应等条件下表达的活性区域。通过渐进缺失及定点突变等手段对获得的启动子活性区域进行精细的扫描式分析，最终找出调控OsPR-4b基因表达的功能性元件。该项目的完成将为从分子水平上阐明植物PR-4类抗病防卫反应基因的表达调控机制提供直接的证据。在此基础上，可以进一步利用发现的顺式元件直接找到与之互作的反式因子，从而促进对植物的抗病防卫反应机制的深入认识。

结论摘要：

植物病程相关蛋白是在植物中预存或受病原菌侵染诱导表达的一类蛋白，在植物的抗病反应中具有重要意义。苯并噻二唑（BTH）是水稻的抗病诱导剂，我们从水稻中克隆到一个BTH诱导表达的病程相关蛋白基因OsPR-4b，进一步研究表明该基因参与了水稻的抗病反应。本研究对该基因的启动子进行了功能分析和顺式元件鉴定。构建了和报告基因GUS融合的OsPR-4b基因启动子功能分析的系列缺失体，利用农杆菌介导法转入烟草，分析了启动子在正常生长发育以及与病原菌互作中的时空表达特征。结果发现OsPR-4b全长启动子在烟草中是全生育期组成性表达，在烟草的根、茎、叶、愈伤组织等组织器官都表达。对缺失构建进一步缺失并获得转基因烟草进行分析后，将该启动子的调控区域定位于该基因起始密码子ATG上游的-826～-882bp之间。利用数据库分析发现该区域存在几个W-box 元件，进一步对这几个元件进行突变分析，发现这几个元件就是关键的顺式调控元件。另外，用绿色荧光蛋白标记OsPR-4b并转化洋葱细胞,发现该蛋白位于胞质中。RT-PCR分析表明OsPR-4b在水稻悬浮细胞中受真菌激发子诱导后强烈表达。