首先提取和纯化嗜酸乳酸杆菌的S-层蛋白,研究S-层蛋白对鼠伤寒沙门氏菌的拮抗作用;然后应用Caco-2细胞作为体外模型,检测S-层蛋白拮抗鼠伤寒沙门氏菌粘附及入侵Caco-2细胞的影响,包括细菌的粘附入侵、细胞骨架的变化、信号转导通路和细胞凋亡中几种因子的变化等。结果显示1) 在竞争、排斥、置换三种粘附试验中,S-层蛋白可显著拮抗鼠伤寒沙门氏菌对Caco-2细胞的粘附;此外,S-层蛋白也能显著拮抗鼠伤寒沙门氏菌入侵,其中竞争试验效果最好。2) S-层蛋白能够拮抗鼠伤寒沙门氏菌对Caco-2细胞微丝和跨膜电阻的破坏。3) S-层蛋白可显著拮抗鼠伤寒沙门氏菌对Caco-2细胞ERK1/2、JNK和p38的磷酸化。4) S-层蛋白可抑制Caco-2细胞Caspase-3的活化、激活ERK1/2信号通路,拮抗鼠伤寒沙门氏菌引起的细胞凋亡损伤。结果表明S-层蛋白可能通过与鼠伤寒沙门氏菌竞争粘附受体;拮抗鼠伤寒沙门氏菌对细胞微丝和跨膜电阻的破坏;通过抑制细菌对细胞ERK1/2、JNK和p38信号通路的活化;以及拮抗鼠伤寒沙门氏菌引起的细胞凋亡损伤,共同介导拮抗鼠伤寒沙门氏菌的粘附及入侵。
英文主题词Lactobacillus acidophilus S-layer protein; Salmonella Typhimurium; adherence and invasion; Caco-2 cells???