本项目主要在克隆表达甘氨肽酰化单氧化酶(PAM)并进行酰胺化修饰研究等工作的同时,针对神经肽加工修饰关键酶PAM的C端结构功能域(CD)所具有的生物功能信息作用,构建了一系列融合有PAM的CD区及其部分缺失区CDT的酵母表达质粒,利用酵母双杂交蛋白筛选系统,在人胎脑、心脏表达文库中筛选与人PAM的CDT有相互作用蛋白的基因。筛选获得阳性克隆并制备相应的质粒DNAs,经过酶谱分析和序列测定,以及进行同源序列比较等分析,确定得到5种与人PAM的CDT区有相互作用蛋白的已知编码基因,为深入基因表达、抗体制备和研究神经肽加工修饰及其调控、神经系统功能的分子机制奠定了基础。
英文主题词PAM; Amidating; Neuropeptide; Yeast two-hybrid system; Interacting proteins