中文摘要：

根据肝移植排斥反应时活化淋巴细胞主要浸润肝脏汇管区的病理特点，利用骨髓源性肝干细胞（BDHSC）在肝脏汇管区靶向定植的生物学特性,建立近交系大鼠肝移植模型，分离受体的BDHSC并用已构建的携带PD-L1-Ig或DcR3基因的腺相关病毒感染，将转染基因的BDHSC经门静脉注入供肝。观察移植肝存活及肝脏病理改变；通过检测汇管区PD-L1-Ig与DcR3的表达、移植物内淋巴细胞浸润和细胞因子、趋化因子的表达情况阐述其作用机制；探讨增强汇管区PD-L1-Ig与DcR3基因的表达在诱导肝移植耐受中的作用及其与常规免疫抑制剂CsA的协同效果。这一研究思路利用BDHSC在肝脏汇管区靶向定植的特性，提高免疫抑制分子在汇管区的局部浓度，不仅有助于保护供肝免受活化淋巴细胞的攻击，而且对全身免疫系统的影响小，在一定程度上实现了"局部特异性"的免疫抑制，可望为移植肝长期存活和防止慢性排斥反应提供新的、可行的途径。

结论摘要：

根据肝移植排斥反应时活化淋巴细胞主要浸润肝脏汇管区的病理特点，增强汇管区PD-L1或DcR3基因的表达，可望提高免疫抑制分子在汇管区的局部浓度，保护移植肝免受活化淋巴细胞的攻击，从而为防止肝移植排斥反应提供新的的途径。在本项目研究中，我们通过优化转染AAV-293细胞的条件，分别构建了携带PD-L1和DcR3基因的重组腺相关病毒（AAV）颗粒并进行纯度鉴定及其在真核细胞中的表达鉴定。以近交系大鼠肝移植模型为基础，分别将重组DcR3/AAV、PD-L1/AAV感染移植肝脏，通过记录大鼠的生存情况、观察DcR3及PD-L1在肝脏汇管区的表达及肝脏病理改变、检测肝脏功能、移植物内淋巴细胞浸润和细胞因子、趋化因子的表达情况。结果发现肝外器官中始终没有转染的DcR3、PD-L1基因表达；DcR3、PD-L1在汇管区中的表达与肝移植大鼠生存时间延长，肝功能损害时间滞后、程度轻，肝脏组织中淋巴细胞浸润时间滞后、数量减少及肝组织的破坏程度减轻相关。本研究结果证明PD-L1和DcR3基因转染对大鼠移植肝有保护作用，可延长其存活时间，具有潜在的临床应用价值。