提高青蒿中青蒿素含量是植物次生代谢研究领域热点之一。导致青蒿素含量低的两个重要因素可能是二氢青蒿酸(DHAA)的积累水平及其转化为青蒿素的效率。青蒿醛Δ11(13)双键还原酶(DBR2)基因在酵母中得到初步验证,证实DHAA合成依赖于DBR2表达,然而DBR2基因功能缺乏转基因证据。本研究构建DBR2基因超表达及基因沉默载体转化青蒿,考察DBR2基因对青蒿素及其前体DHAA生物合成的影响,在转基因植株中直接明确DBR2基因的功能;DHAA转化为青蒿素依赖于胞内活性氧物质(ROS)的生成,本研究采用DMSO刺激DHAA含量高的超表达DBR2株系,运用DAB法及光谱法测定胞内ROS,qPCR定量分析关键基因的表达,检测DHAA与青蒿素含量的动态变化,明确胞内ROS对DHAA转化为青蒿素的作用。本研究探讨超表达DBR2基因与胞内ROS的协同作用对青蒿素合成的影响,为青蒿素的代谢工程提供了新思路。
英文主题词artemisinin;DBR2;over expression;metabolic regulation;JA signal pathway