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摘要夲研究对141株临床分离碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌的耐药性研究，发现96株耐美罗培南的铜绿假单胞菌中约有69.1%的菌株具有外排泵机制；对外排泵编码基因的检测及调控基因序列分析的结果，示外排泵系统MexAB等的过度表达主要是由于其相应的调节基因突变所致。根据已有的siRNA设计原则针对外排泵MexAB系统的MexA蛋白基因序列设计大小约为19-21bp长度的siRNA片段，并构建到穿梭质粒pMMB67EH中，经采用电转化、共培养等方法以提高和扩大mexA221 siRNA干扰作用，并转化到耐药铜绿假单胞菌中进行研究，获得的转化子经药敏试验和Realtime PCR测定干扰后的细菌对药物的敏感性和MexA表达的下调水平，结果显示获得的转化子的耐药性有2种形式，①耐药→敏感，②而大部分转化子没有发生耐药性改变。本研究结果显示①外排泵机制是造成铜绿假单胞菌对美罗培南耐药的主要原因，②mexA221 siRNA的干预作用是可以影响细菌对抗菌药物的敏感性，③本研究是一项寻求外排泵机制引起的耐多药铜绿假单胞菌感染治疗新途径的探索性研究，存在工作量大、困难较多。