本项目在斑马鱼中克隆了雌激素膜受体GPR30(亦称GPER)。RT-PCR 结果显示,斑马鱼GPR30 (zfGPR30) 在脑和性腺丰度最高。原位杂交结果发现,zfGPR30 主要分布在雄性早期生殖细胞如精原细胞和精母细胞以及Sertoli 细胞,而在精子细胞中检测不到信号。提示GPR30 蛋白可能在斑马鱼早期精子发生过程中发挥作用。配体受体结合率检测发现,雌二醇与zfGPR30的亲和常数为4.6nM。zfGPR30 在各种浓度的雌二醇处理下都不能显著刺激c-fos 基因启动子偶联的萤光素酶的表达;而在10-8 M 雌二醇浓度下即可显著性地启动带有腺苷酸环化酶应答元件的启动子偶联的萤光素酶基因的表达。外源性雌二醇浸泡处理成年雄性斑马鱼,能诱导精子细胞或精子的明显凋亡,而核受体拮抗剂ICI182, 780 和芳香化酶抑制剂Fadrozole 则对早期和晚期生殖细胞的凋亡都起促进作用。通过检测斑马鱼凋亡相关基因,提示17β-E2、ICI182, 780 和Fadrozole 通过Fas 途径引发精子细胞的凋亡,而后两者同时通过p73 途径引起精子发生早期精母细胞的凋亡。
英文主题词zebrafish (Danio rerio), estradiol-17β, Gper (GPR30), spermatogenesis, germ cell apoptosis