利用自行克隆的我国优良纯种番茄果实特异性E8启动子驱动弓形虫多表位抗原基因(MAG),转染优良纯种番茄,筛选鉴定获取高效稳定表达的转基因植株;子代遗传分析、育种获得纯种;探索乙烯反应性果实聚集性表达的可调控表达模式;优化果实的保藏与运输等环节,以建立并完善番茄果实特异性高效稳定表达技术平台。并且,通过喂饲小鼠、大鼠、羊等动物,建立一套科学的转基因番茄口服疫苗的有效性和安全性评价体系。一方面,研制弓
利用自行克隆的我国优良纯种番茄果实特异性E8启动子驱动弓形虫多表位抗原基因(MAG)和经截短后的速殖子主要表面抗原(tSAG1),转染优良纯种番茄,筛选鉴定获取高效稳定表达的转基因植株,子代遗传分析、育种获得T1~T3代的稳定表达株,其中1株tSAG1表达量可达番茄组织可溶性蛋白的10%以上。优化果实的保藏与运输等环节,证实真空冷冻干燥法是可行的转基因番茄贮藏方法, 纯化后的重组蛋白鉴定具有良好的免疫学活性,用于ELISA检测小鼠动物模型和人血清IgG、IgM抗体,具有良好的敏感性和特异性。初步建立了弓形虫急性、慢性动物模型并进行转基因番茄果实的喂饲实验。以弓形虫疫苗候选分子转基因番茄植株为模式生物建立了转基因成分的多重复合PCR快速检测体系。构建了"南方转基因生物网"并进行了调试和网上试运行。本研究建立并完善番茄果实特异性高效稳定表达技术平台,为弓形虫和其他疾病转基因番茄口服疫苗的深入研究奠定了一定的工作基础。发表论文1篇,国际会议论文4篇,申请中国发明专利1项,待发表论文4篇,副主编医学生选修课教材1部。