利用LCM技术获取HSC-3-M3颊癌动物模型癌周毛细淋巴管内皮细胞(LCEC),通过对LCEC的特异基因的筛选和功能分析,明确与淋巴转移密切相关的功能基因,制备单克隆抗体或诊断试剂盒,建立一套准确实用的技术用以诊断早期肿瘤的淋巴转移;同时通过癌周LCEC特异基因的功能分析,明确恶性上皮源性肿瘤发生淋巴道转移与癌周毛细淋巴管的相关作用机制和途径,构筑淋巴转移研究的理论平台。
明确口腔癌淋巴道转移的机制是改善口腔癌预后的关键。在淋巴道转移的过程中,肿瘤细胞与LEC相互作用是转移过程中的关键事件。明确口腔癌中LEC的功能特性可以近一步的研发新的治疗手段进行转移的阻断。本研究中利用TCa8113与LEC共培养,作为研究肿瘤淋巴管内皮(TLEC)的模型。与正常的LEC相比,TLEC具有较强的增殖活性,淋巴管生成能力及抵抗凋亡的能力。基因表达谱显示,正常的LEC与TLEC具有677个差异表达基因,其中384个上调的基因,293个下调的基因。其中与淋巴道转移相关的基因应用实时定量PCR进行了验证。此外,对临床标本中的LEC进行了分离,并对转移相关的生长因子及趋化因子进行了实时定量PCR检测。为了明确肿瘤细胞与LEC相互作用,我们又建立了不同转移能力的细胞株,并进行了基因表达谱的检测,差异表达的基因与肿瘤细胞淋巴道转移过程中多种细胞生物学行为的改变有关。研究结果表明,肿瘤中的LEC具有异常的生物学行为,在分子水平同样存在着差异。不同转移淋巴道转移能力的细胞中差异表达的基因与肿瘤的转移能力有关,LEC与肿瘤细胞差异基因表达联系起来,可以为寻找基因治疗靶点提供依据。