高效生物合成途径的建立,是提高酵母工程菌合成植物源萜类产量的重要基础。研究发现合成途径中各基因的协调性高表达能有效降低代谢中间体的积累所导致的代谢负荷和细胞毒性,显著提高目的产物的产量。本研究拟用酵母启动子文库,结合多基因体内同源重组方法,对酿酒酵母IPP 和GGPP生物合成途径的基因表达进行系统的精细调控。在此基础上用鲨烯(三萜)和次丹参酮二烯的生物合成模块分别对IPP和GGPP底盘工程菌进行测评;新获得的三萜底盘工程菌用20(S)-原人参二醇的生物合成模块进行进一步测评;最后结合RT-PCR分析代谢途径中各基因的表达谱,GC-MS和LC-QTOF-MS/MS分析其化学代谢物来探讨高效生物合成途径中基因表达的协调机制。本工作将为在酵母中建立高效生产植物源化合物的合成途径奠定基础。
英文主题词Ginseng-Yeast;Synthetic Biology;Medicinal terpenoids;Natural Products;Biosynthetic pathway