狂犬病是一种重要的人兽共患传染病。狂犬病病毒的糖蛋白和核蛋白分别是狂犬病病毒诱导机体产生体液免疫和细胞免疫的主要结构蛋白。为了实现狂犬病病毒糖蛋白和核蛋白在犬2型腺病毒中的重组和表达, 阐明相应重组病毒的生物学和免疫学特性, 本研究将以E3区缺失的犬2型腺病毒作为活载体,首先分别构建载有狂犬病病毒SRV9疫苗株糖蛋白和核蛋白cDNA的重组基因组,再通过转染犬肾细胞系获得重组病毒。鉴定和分析重组病毒
狂犬病是一种重要的人兽共患传染病。狂犬病病毒的糖蛋白和核蛋白分别是诱导机体产生体液免疫和细胞免疫的主要结构蛋白,为了实现其在犬2型腺病毒中的重组和表达, 阐明相应重组病毒的生物学和免疫学特性, 本研究以E3区缺失的犬2型腺病毒作为活载体,分别构建载有狂犬病病毒疫苗株和野毒株的糖蛋白和核蛋白cDNA的重组基因组,再通过转染犬肾细胞系(MDCK)获得了5种表达上述外源蛋白的重组病毒。实验室研究表明,重组病毒的理化学特性、遗传稳定性、病毒复制水平、感染力及病原性与载体病毒无明显差别;重组病毒经口服或肌注感染犬和猫后,均可产生针对外源蛋白的抗体,其中表达糖蛋白的重组犬2型腺病毒,可刺激机体产生保护水平的狂犬病中和抗体。完成了表达糖蛋白的重组病毒CAV2-E3Δ-CGS的中间试验、环境释放及生产性应用等全部三个阶段的生物安全评价,结果表明,该重组病毒对易感动物即犬安全,遗传稳定性良好,未发现外源基因向受试环境内动植物、微生物及水体转移。本研究明确了以犬2型腺病毒为载体的狂犬病抗原重组病毒的相关特性,为此类重组病毒的生产及应用奠定了理论和技术基础。